門多 真理子

ホスホケトラーゼ(PK)はヘテロ乳酸発酵を担うが、Enterococcus mundtii QU 25株ではその遺伝子xfpAはホモ乳酸発酵条件においても恒常的に転写されていた。PK活性の制御メカニズムを知るため、ホモ乳酸発酵条件とヘテロ乳酸発酵条件の細胞中の酵素タンパク質XfpAの量をウエスタンブロッティングで調べた。その結果XfpAの量は両方の条件で類似していた。また、XfpAはどちらの条件でもホモダイマーを形成していると推定された。以上のことから、PK活性の制御メカニズムは翻訳後であると示唆された。

エジプトの土壌から分離され、バンコマイシンには中程度耐性を示すEnterococcus faecium QU50の完全ゲノムを報告する。このゲノムは2,535,796塩基対の環状染色体と、196,595塩基対と17,267塩基対の大小2つのプラスミドから成っていた。 IS1062様の配列は見つけることが出来なかった。

Some of the lactic acid bacteria (LAB) have been considered to contribute to human health and are used in foods and pharmaceutical products as probiotics. Basic studies on the specific effects of these bacteria and their mechanisms of action are indispensable to the verification of their effectiveness. The development of molecular biological techniques plays an important role in the advancement of these studies.Lactobacillus caseistrain Shirota is a lactic acid bacterium isolated from the human intestine and has been used industrially as a probiotic strain, whose beneficial effects on humans and animals, including an immunomodulatory function, are well documented. This report summarizes the developmental situation of genetic manipulation inL. caseistrain Shirota as follows: 1) transformation and plasmid vectors, 2) a system using an integration-excision vector to maintain desired sequences safely and stably on its chromosome, and 3) experimental display of a chimeric protein on the cell surface of the strain Shirota.

乳酸菌における遺伝および育種研究の方法論に関する総説。生態系や食品等への利用上、および研究材料としての乳酸菌の特徴、乳酸菌研究の歴史、乳酸菌の遺伝子構成や構造上の特徴、遺伝子発現機構の解析法、古典的な変異株や育種株の取得方法からここ 10年程で急速に進歩しつつある組換えDNAの方法について解説した。これらの研究は、系統分類学の方法を表現型による分類から遺伝子型による分類へと変えるのに大きく貢献している。

乳酸桿菌(<I>Lactobacillus</I>)属の細菌細胞に溶菌酵素を作用させて作製したスフェロプラストとリン脂質でファージ DNAを包んだリポソームを融合させることによりDNA感染が起きることが明らかとなったので、ファージベクターを開発して、このDNA感染法を組換えDNA分子を細胞内に導入することに適用させれば、乳酸桿菌（<I>Lactobacillus</I>)属の細菌において宿主－ベクター系を開発し、遺伝子操作技術を用いて菌の改良が可能と考えられた。

A new restriction endonuclease, SlaI,was found and partially purified from <I>Streptomyces lavendulae</I> ATCC8664. The 5'- mononucleotide present after cleavage with SlaI was mostly dTMP determined by chromatography on PEI-cellulose thin layer. The recognition sequence of SlaI was identified by electrophoreses on cellulose-acetate film, followed by homochromatography on a DEAE-cellulose thin-layer plate. The determined recognition sequence was 5'-C-G-A-G-3'.